发布者:技术转移办公室发布时间:2025-04-14浏览次数:10
技术主题:检测与应用
发明名称:一种膜蛋白的纯化方法
申请时间:2022-05-09
申请号:CN202210502969.3
摘要:本发明涉及蛋白质工程领域,特别是涉及一种膜蛋白的纯化方法,所述纯化方法包括以下步骤:1)重悬收集的表达目的膜蛋白的细胞沉淀,破碎细胞,离心去除细胞碎片;2)超速离心沉淀细胞膜;3)用低盐缓冲液重悬细胞膜沉淀,超速离心弃上清;4)用高盐缓冲液重悬细胞膜沉淀,超速离心弃上清;5)重悬细胞膜沉淀,超声波均质;6)离心弃沉淀,保留上清后过滤即得到目的膜蛋白。本发明在膜蛋白提取过程中不需要去垢剂溶解生物膜或高分子聚合物包裹膜,摆脱了对去垢剂和额外添加磷脂的依赖,免除了对膜蛋白的重构,避免了复杂的纯化过程可能对膜蛋白结构和功能的破坏,可以获得更接近生理活性状态下的膜蛋白。