一种携带修饰的小RNA的建库方法及其应用

发布者：技术转移办公室发布时间：2021-10-15浏览次数：10

技术主题：检测与应用

发明名称：一种携带修饰的小RNA的建库方法及其应用

申请时间：2021-04-02

申请号：CN202110363305.9

摘要：本发明提供一种携带修饰的小RNA的建库方法，至少包括如下步骤：1)利用氨基酸去除试剂去除携带修饰的小RNA末端的氨基酸残基；2)利用第一转化剂使携带修饰的小RNA的5’端的5‑cap转化为5’P；3)利用第二转化剂使携带修饰的小RNA的5’端的5’‑OH转化为5’P，3’P和2’，3’‑cP端转化为3’‑OH；4)利用去甲基化试剂去除携带修饰的小RNA的甲基化修饰；5)将携带修饰的小RNA连接测序接头；6)利用包括逆转录酶在内的逆转录试剂将携带修饰的小RNA反转录成cDNA；7)将cDNA纯化后进行PCR扩增，获得携带修饰的小RNA的测序文库。本发明提供了一种新的小RNA建库方法为生命体内丰富复杂携带修饰的小RNA提供了一个强大的灵敏的分析工具。