发布者:技术转移办公室发布时间:2021-10-15浏览次数:11
技术主题:检测与应用
发明名称:一种非对称转座子及其应用
申请时间:2015-12-08
申请号:CN201510898429.1
摘要:本发明提供了一种非对称转座子及其应用。所述的非对称转座子的应用方法包括:将目的基因克隆至转座子目标质粒;将纯化的转座子、含有目的基因的质粒与转座酶在缓冲液中混合进行转座子反应;将转座反应产物转化进大肠杆菌感受态细胞,对读码框内的转座子插入进行筛选;收集获得菌落,提取质粒DNA,此为转座子随机插入文库;以转座子随机插入文库DNA为模板,进行PCR扩增,将纯化的PCR产物依次进行Bsg I酶切和平末端处理,然后进行连接反应,得到缺失突变文库。本发明可实现1至5个氨基酸缺失。